郑州大学第一附属医院杨建军等团队AM!!仿生工程化病毒模拟囊泡用于增强STING激动剂向树突状细胞的胞质递送

肿瘤免疫治疗面临的核心挑战之一是"冷肿瘤"问题，即免疫抑制性肿瘤微环境阻碍了抗原呈递和T细胞 priming 过程。STING（干扰素基因刺激因子）信号通路作为连接先天免疫与适应性免疫的关键节点，能够将免疫"冷"肿瘤转化为"热"肿瘤，因而成为癌症免疫治疗的重要靶点。环二核苷酸（CDN）类STING激动剂如ADU-S100已进入临床试验阶段，但其临床转化受限于两大瓶颈：一是CDN带有双负电荷，难以穿透细胞膜进入胞质激活STING受体；二是STING蛋白在多种细胞类型中广泛表达，非特异性激活可导致T细胞凋亡、调节性B细胞增殖及免疫检查点分子上调，反而促进免疫逃逸。树突状细胞（DCs），特别是I型常规树突状细胞（cDC1s），因其卓越的抗原交叉呈递能力和T细胞 priming 功能，被认为是STING激动剂的最优靶细胞。然而，如何实现CDN向cDC1s的特异性靶向递送，同时确保高效的内涵体逃逸，仍是该领域亟待解决的关键科学问题。

在这项研究中，研究人员开发了一种基于登革病毒（DENV）的病毒样颗粒（VLP）递送平台，用于实现STING激动剂向树突状细胞的精准胞质递送。研究团队利用DENV-2型prM/E基因构建稳定表达细胞系，通过蔗糖密度梯度离心纯化获得直径约50 nm的VLP2，并采用电穿孔技术将CDN（ADU-S100）封装其中，载药效率达75.72%。通过系统筛选四种DENV血清型（VLP1-4），研究发现DENV3型VLP3具有最优的DC靶向能力，其E蛋白与DC表面受体DC-SIGN（CD209）的结合自由能最低（-156.09 kcal/mol），较VLP2提升2.3倍cDC1靶向积累。机制研究表明，VLP通过DC-SIGN介导的内吞作用进入DCs，随后在酸性内涵体环境中E蛋白构象改变触发膜融合，实现内涵体逃逸和胞质释放。在B16F10黑色素瘤模型中，瘤内注射5 μg CDN@VLP3即可实现97.26%的肿瘤抑制率，较游离CDN提升疗效40倍且无剂量限制性毒性。转录组分析进一步揭示，CDN@VLP3通过上调XCL1、CCL4和CCL5等关键趋化因子，促进cDC1向肿瘤的募集，形成"招募-摄取-激活"的正反馈环路。此外，该平台与抗PD-1抗体联用可产生协同抗肿瘤效应，静脉给药亦显示良好疗效和安全性。

该研究建立的CDN@VLP平台通过仿生模拟登革病毒天然嗜性，成功解决了STING激动剂临床应用中效力与特异性的权衡难题。该平台的核心优势体现在三个层面：在靶向层面，VLP3通过E蛋白与DC-SIGN的高亲和力结合，实现cDC1特异性摄取，同时减少CD8+ T细胞的非特异性内吞（降低14.8倍），避免T细胞耗竭；在递送层面，病毒源性E蛋白介导的内涵体逃逸机制确保CDN高效进入胞质，激活STING通路，诱导I型干扰素持续产生（IFN-β提升12.8倍）；在免疫调控层面，该平台不仅直接激活cDC1，还通过趋化因子网络促进其肿瘤浸润，重塑免疫微环境。研究还证实该平台具有良好的淋巴引流能力和全身给药潜力，为转移性肿瘤治疗提供了新策略。该工作为STING激动剂的临床转化建立了可推广的范式，也为其他需细胞特异性递送的生物制剂（如疫苗、基因治疗载体）提供了重要的技术参考。未来研究可进一步优化VLP表面修饰（如PEG化）以降低潜在免疫原性，拓展其重复给药的应用场景。